Л.В. Михиенкова, к.т.н., О.А. Хомицкая, Е.В. Загорулько, Л.Н. Янченко. Украинский государственный научно-исследовательский институт «Ресурс»

Оценка антимикробного действия дезсредства

«Биолонг» на микрофлору объектов Госрезерва

Ассортимент антимикробных препаратов для дезинфекции достаточно разнообразен. В Украине каждый год получают разрешение и регистрируют все больше новых средств с антимикробным эффектом. Однако в результате борьбы человека с микрофлорой преимущество, к сожалению, не за человеком. В итоге этого поединка возрастает количество микроорганизмов, устойчивых ко многим классам химических соединений. Очевидно, разрабатывая новые химические средства для борьбы с микроорганизмами, к которым те, в свою очередь, приспосабливаются, человек создает условия к изменчивости микрофлоры, тем самым инициируя появление новых устойчивых к дезсредствам штаммов микроорганизмов.

ВУкраинеи других странах находят применение новые дезсредства, в большинстве случаев, лучше своих предшественников и их аналогов по эффективности, технологическим характеристикам, безопасности для здоровья человека и окружающей среды. К таким средствам относится препарат на основе четвертичных аммонийных соединений (ЧАС) – «БиоЛонг» (4 класс опасности).

Целью данной работы было изучение антимикробного действия дезинфицирующего средства «БиоЛонг» на референс-микрофлору и микрофлору объектов госрезерва.

Материалы и методы исследования. Моделями бактериальных загрязнений служили эталонные тест-культуры S.aureusАТСС 25923, E.coliATCC25922, C.albicansATCC885-653, - B.subtilisАТСС 6633, B.cereusATCC11778, AspergillusnigerАТСС 16404. А также штаммы микроорганизмов, выделенных из объектов Госрезерва: бактерии – Escherichiacoli, Salmonellasp., Pseudomonasputida, Pseudomonasfluorescens, Pseudomonasmalei, Bacillussubtilis, Bacilluscereus, Bacillusmezentericus; плесневые грибы – Mucormucedo, Mucorsinensis, Mucorracemosus, Aspergillusfumigatus, Aspergillusniger, Penicilliumchrizogenum, Penicilliumpuberulum. Концентрация тест-штаммов в эксперименте составляла 108-107 КОЕ/мл (колониеобразующие единицы).

Микробиологическому изучению подвегнуты растворы дезинфектанта: 0,1%; 0,2%; 0,3%; 0,4%; 0,5%; 1,0%; 2,0%; 3,0%; 5,0%. Экспозиция микрофлоры и дезсредства составляла 15 мин.; 30 мин.; 60 мин.; 90 мин. Микрофлору из объектов предприятий выделяли методом смывов с поверхностей, культивировали на соответсвующих питательних средах,  проводили идентификацию выросших колоний микроорганизмов.

Изучение антимикробных свойств препарата проводили суспензионным методом и оценивали согласно европейским стандартам по коэфициенту редукции (R), выраженному в логарифмах (lg). Эффективность биоцидного действия  средства для бактерий составляла 5 lg, для грибов – 4 lg.

Результаты исследований и их обсуждение. Результаты влияния дезсредства на референс-микрофлору представлены в табл. 1.

Таблица 1. Определение бактерицидного действия дезсредства «БиоЛонг»  на эталонные штаммы микроорганизмов в логарифмах редукции (lgR)

Сравнительные исследования показали, что рефернс-микрофлора более чувствительна к действию антибактериального средства, чем выделенные из объектов резерва штаммы. Подобное явление обусловлено механизмами выживания микроорганизмов во внешней среде. Одним из таких является способность активно взаимодействовать между собой с выделением низкомолекулярных сигнальных молекул химических соединений, при достижении критической концентрации которых активируются защитные гены. В результате такого взаимодействия образуется биопленка, защищающая микроорганизмы полисахаридным матриксом, позволяющим приобрести устойчивость к воздействию внешних факторов.

Бактериостатическое действие дезсредства на грамотрицательную микрофлору объектов (E.coli, Salmonellasp., Pseudomonasputida, Pseudomonasfluorescens, Pseudomonasmalei) проявилось в концентрации препарата 0,2%. Уже  при экспозиции 15 минут количество бактерий по отношению к контролю было в пределах 3,2-4,7 lgв зависимости от вида микроорганизмов. Концентрация биоцида 0,3%; 0,4% стала бактерицидной, логарифм редукции составлял от 5,0 до 7,6 lg(табл. 2).

Таблица 2. Определение бактерицидного действия дезсредства «БиоЛонг» на бактериальную микрофлору объектов Госрезерва (lgR)

Положительные результаты, полученные по экспериментальному подбору концентраций препарата на грамотрицательные штаммы бактерий, позволили приступить к изучению действия препарата на спорообразующие палочки и плесневые грибы. Влияние дезсредства на грампололожительную споровую  микрофлору  представлено в табл. 3.

Таблица 3. Определение бактерицидного действия дезсредства «БиоЛонг» на представителей рода Bacillusобъектов Госрезерва (lgR)

Концентрации «БиоЛонга» 0,3-0,4% оказывали обеззараживающее действие на бациллярную микрофлору в пределах 5,0-5,9lg. Уже через 15 минут взаимодействия препарата и микроорганизмов наблюдался биоцидный эффект. Учитывая устойчивость данного вида микрофлоры к действию дезсредств, выявленный эффект можно объяснить образованием бактерицидной пленки с «шипами», обнаруженной методом электронной микроскопии, «шипы» прошивают клетку, приводя к гибели.

Заявленные в эксперименте концентрации дезсредства проявили избирательное действие на представителей плесневых грибов. Концентрация препарата 0,2% обладала малозначительным действием на указанные микроорганизмы   (табл. 4).

Таблица 4. Определение бактерицидного действия дезсредства «БиоЛонг» на плесневые грибы объектов Госрезерва(lgR)

В эксперименте отмечен антимикробный эффект на представителей микрофлоры, контаминирующие продовольственные объекты Госрезерва. Концентрация 0,3% была активной для бактерий и плесневых грибов рода Penicilliumи Mucor, а для аспергилл (Aspergillus) – бактериостатической. Раствор препарата 0,4% проявил 100% обеззараживающее действие на все виды тест-микроорганизмов.

Выводы

Адаптированные к условиям обитания микроорганизмы приобретают устойчивость ко многим дезсредствам, однако испытуемый препарат проявил хороший антимикробный эффект на представителей референс-микрофлоры и микрофлоры объектов Госрезерва. Поскольку в состав средства входят изопропиловый спирт, обладающий прижигающим действием, безалконий хлорид и н-октодецилдиметил (3-триметоксиселил) пропил аммония хлорид, поверхносно-активные катионные детергенты, характеризующиеся тем, что встраиваются в оболочку клетки, взаимодействуя с липопротеидами мембраны,  снижают барьерную функцию, а затем и ее гибель. Действие средства усиливается наличием бактерицидной пленки с «шипами» в результате чего  проявляется широкийспектр действия препарата «БиоЛонг» на бактерии, дрожжеподобные грибы рода Кандида и споровую микрофлору.

В  характеристике антимикробного действия любого вещества важным является наличие бактерицидного или бактериостатического эффекта, а также выявление возможной реактивации микроорганизмов после устранения действующего агента. У испытуемого средства обращает на себя внимание уникальная  особенность – наличие пролонгированного эффекта. При проведении контроля качества дезинфекции на объектах резерва, реактивация микрофлоры не наблюдалась в течении месяца. Следовательно, выявленные свойсва препарата  требуют детального изучения.

Итак, экологически чистый, безопасный для здоровья человека и окружающей среды дезинфектант «БиоЛонг» целесообразно применять на предприятиях системы Госрезерва (холодильных камерах, складах и т.д.), а также в лечебно-профилактических учреждениях, объектах общественного питания др. с целью проведения текущей и заключительной дезинфекции для профилактики возникновения инфекционных заболеваний.

Список литературы

1. EN13624:2003 Chemicaldisinfectantsandantiseptics. Quantitativesuspensiontestfortheevaluationoffungicidal activity for instruments used in medical area. Test method and requements (phase 2, step 1). – Brussels: European  Committee for Standardization, 2003. – 36 p

2. EN 13727:2003 Chemical disinfectants and antiseptics. Quantitative suspension test for the evaluation of bactericidal activity of chemical disinfectants for instruments used in the medical area – Test method and requements (phase 2, step 1). – Brussels: European  Committee for Standardization, 2003. – 36 p

3.Bronzwaer S., Cars O., Buchholz U. European study on the relationship between antimicrobial use and antimicrobial resistance // Emerg. Infect. Dis., 2002. – V. 8. – P. 278-282.

4. Гинцбург А. Л., Ильина Т. С., Романова Ю. М. Quorumsensing» или социальное поведение бактерий  // Микробиология. − 2003. − №  5. – С. 86-93.

5. Lenoir-Wijnkoop I. The intestinal microflora. Understanding the simbiosis/ Montrouge: John Libbey Eurotext, 2003. – 48 p.

6. Краснова М. В., Финогенов Г. Е., Афиногенова А. Г., Егорова Л. Л. Качество дезинфекционных и антисептических мероприятий в зависимости от выбора препаратов // Задачи современной дезинфектологии и пути их решения : материалы Всероссийской. науч. конф., посв. 70-летию НИИД МЗ РФ. – М. : ИТАР-ТАСС. – 2003. − С. 159-160.

7. Голубкова А. А., Вотчинский В. М., Ганебная Н. Е. Сочетанное применение и чередование дезинфектантов в программах эпиднадзора за нозокомиальными инфекциями // Материалы VІІІ Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, 26-28 марта 2002. – М. : РОСИНЭКС. – 2002. − Т. 4. – С. 15-16.

8. Васильева К. Д., Еременко В. А., Техова И. Г. Тактика выбора дезинфектантов и антисептиков в стационарах // Задачи современной дезинфектологии и пути ее решения : материалы Всероссийской науч. конф. − М. : ИТАР-ТАСС. − 2003. − С. 114-115.

9. Бахир В. М., Вторенко В. И., Леонов Б.И. Эффективность и безопасность химических средств для дезинфекции, предстерилизационной  очистки и стерилизации // Дезинфекционное дело. – 2003. − № 1. – С. 29-36.

10. Зарицкий А. М. Эпидемиологическая концепция применения дезинфицирующих средств // Сборник материалов Совещания-семинара по актуальным вопросам дезинфекционного дела (11-13 сентября 2002 г., г. Севастополь). − Киев, 2002. − С. 19-22.